铜蓝蛋白(Ceruloplasmin ，Cp) 测定试剂盒说明书

可见分光光度法

注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白，有运输铜的功能，同时具有氧化酶的活性，是细胞外液重要的抗氧化剂。

测定原理

铜蓝蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物，在645nm处有特征吸收峰，依此可得铜蓝蛋白活性。

自备实验用品及仪器

天平、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制

试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体 20mL×1 瓶，4℃避光保存。（使用前 37℃预热）

测定操作表

	空白管	测定管
样品（μL）	100	100
试剂一（μL）	300	300
试剂二（μL）	200
混匀，37℃预热 5min
试剂三（μL）	400	400
混匀，37℃反应 30min
试剂二（μL）		200
混匀，25℃放置 5min，1 mL玻璃比色皿,空白管调零，测定 OD645

计算公式

单位定义：37℃条件下，每分钟每毫升样品与底物作用吸光值升高 0.01 为一个酶活单位。

Cp 活力（U/mL）= OD 645÷0.01×V 反总÷V 样÷T=33.33×OD 645

V 样：0.1 mL；V 反总：1 mL；T：反应时间，30min；

注意事项

试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性，请操作时做好防护措施。