氨基磁珠(Mag-NH2)
产品描述
Mag-NH2系列磁珠具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富氨基官能团、单分散性等特点,能够在特殊化学试剂(如戊二醛)的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物配体共价偶联到微球表面,是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。纳米-亚微米级的粒径,使其具有更快的磁响应性同时保持微球良好的分散性、极低的非特异性吸附和更丰富的结合位点等特性,能便捷高效地与多种生物配体(蛋白、多肽、寡聚核苷酸、药物分子等)进行高载量结合,可作为良好的基础材料进行包被、吸附、化学改性等后续处理。
产品信息
项目 |
Mag-NH2-200 |
Mag-NH2-1000 |
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平均粒径* |
200 nm(单分散) |
1000 nm(单分散) |
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浓度 |
10 mg/ml |
10 mg/ml |
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表面基团含量 |
氨基(∽350 μM/g) |
氨基(∽200 μM/g) |
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磁核 |
Fe3O4 |
Fe3O4 |
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壳层 |
氧化硅 |
氧化硅 |
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磁性类型 |
超顺磁性 |
超顺磁性 |
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饱和磁化强度 |
∽ 60 emu/g |
∽40 emu/g |
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比表面积 |
∽50 m2/g |
∽10 m2/g |
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保质期 |
在2-8℃稳定保存,保质期两年 |
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*水化平均粒径,Malvern Nano测定 |
产品优势
1. 磁珠粒径为纳米-亚微米尺度,比表面积大,丰富的结合位点,加强与配体的特异性结合。
2. 超顺磁性和高磁响应性,节省操作时间。
3. 良好的分散性和重悬性,提高操作的便捷性。
4. 良好的物理化学稳定性,保障重复性效果。
磁珠与生物分子的偶联方法(以蛋白A/G为例)
1. 磁珠预处理:混匀磁珠后,取100 μL Mag-NH2磁珠到1.5 mL EP管中,磁吸去除上清液,用200 μL PBS溶液(0.1M,pH 7.4)洗涤2次,磁吸去上清;
2. 戊二醛活化:加入新鲜配制的100 μL戊二醛溶液(25%)到EP管中,漩涡混匀使磁珠充分悬浮,用锡箔纸包裹后25℃反应3 h(反应避光,以避免戊二醛自身发生聚合),该期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);
3. 洗涤:磁珠活化后,磁吸去上清,用PBS溶液(0.1M,pH 7.4)洗涤3-5次;
4. 磁珠偶联:向装有磁珠的EP管中加入50 μg~200 μg生物配体(合适用量及浓度需要根据具体实验进行优化,保持溶液pH≈8.0,必要时可加入0.05% Tween -20以提高磁珠分散性),轻柔地混匀;用锡箔纸包裹(反应避光)后25℃偶联3 h,或25℃偶联1 h后放置4℃偶联过夜,偶联期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);
注:由于戊二醛溶液在280 nm出有吸收峰,因此磁珠上偶联蛋白的结合含量不能通过反应前后OD280值变化来计算,可通过BCA试剂盒或蛋白电泳法间接测量。
5. 封闭: 将EP管置于磁分离架上磁性分离去除上清液,加入200-500 μL Tris-HCl (0.1M,pH=8.0)重悬磁珠,25℃反应3 h封闭磁珠表面非特异性吸附位点,封闭后,再加入200-500 μL BSA/PBS溶液(pH 7.2,含1% BSA)二次封闭1h,该期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);
6. 保存:将EP管置于磁性分离架上磁性分离去除上清液,用200 μL PBS溶液(pH 7.2)或保存溶液洗涤3次后,重新悬浮于保存溶液中(可根据需要来确定保存溶液的加入量,以调整偶联配体磁珠的浓度),最后保存于4℃。必要时可以在保存溶液中加入0.02%(w/v) 叠氮化钠(NaN3)抑制细菌生长。
注意事项
1. 磁珠保存在ddH2O中,冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 在使用本产品前,请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。
3. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
4. 为保证最佳的实验结果,请选用合适的配体进行共价偶联反应。
5. 本产品仅供研究使用。