一、测定原理

孕酮检测试剂盒采用间接竞争ELISA法检测尿样和组织等样本中的孕酮，在微孔条上预包被偶联抗原，利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行，样本中的孕酮和微孔条上预包被偶联抗原竞争标记有辣根过氧化酶的抗孕酮抗体，通过洗涤后，用TMB底物显色，样品中的孕酮含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出孕酮含量。

二、规格参数

产品名称：孕酮检测试剂盒

规格：50T/盒

灵 敏 度： 见说明书

检测时间： 45min，75min

储存和效期：2-8℃冷藏，切勿冷冻，有效期12个月，产品都是近期生产。

样本种类：各种动物肌肉组织、尿液、血清、饲料、水产、蜂蜜、牛奶等

检测波长：450nm/630nm

适用范围：仅供科研。

三、独特优势

1，产品灵敏度高、特异性强、重复性好、品种齐全、操作简便，最大限度的节省了实验经费。

2，产品质量有保障，出库质检把控严格，保障产品百分百是优质产品，运输全程跟踪，公司承诺有任何质量问题包退换，诚信经营，合作共赢。

3，现货直供，顺丰速达。

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5，公司本着客户至上的原则为客户提供优质产品并承诺产品有任何质量问题包退换（非人为因素造成的）公司全部产品优惠促销中，欢迎新老客户前来选购，期待您的来电。

 

四、试剂盒组成

1.微量测试孔：1×96孔板（12条×8孔）

2.标准溶液X6瓶：（1ml/瓶）

3.酶标记物      7ml……………………… 红色帽

4.抗体工作液  7ml……………………… 绿色帽

5.底物A液     7ml  ……………………棕色帽

6.底物B液     7ml  ……………………黑色帽

7.终  止  液     7ml  ……………………黄色帽

8.20X浓缩洗涤液40 ml  ………………白色帽

五、操作步骤

1、将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温（20-25℃）平衡30min以上, 注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃不要冷冻。

3、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

4、加标准品/样本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50μl/孔，再加入抗体工作液50μl/孔。用盖板膜封板，轻轻振荡混匀，25℃环境中反应30min。

5、小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液250μl/孔充分洗涤4-5次，每次间隔15-30秒，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

6、显色：每孔加入底物A液50μl，再加底物B液50μl，轻轻振荡混匀25℃环境避光显色15min。

7、测定：每孔加入终止液50μl，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处 （建议用双波长450/630nm，检测在5min内读完数据）测定每孔OD值。

六、注意事项

1、使用前将所有试剂温度回升至室温20-25℃。试剂及标本没有回到室温（20-25℃）会导致所有标准的OD值偏低。

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会伴随着出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3、混合要均匀，否则会出现重复性不好的现象。

4、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。

5、不要使用过了有效日期的试剂盒，稀释或搀杂使用会引起灵敏度、OD值的变化。不要交换使用不同批号的盒中试剂。

6、不用的微孔板放进自封袋密封；标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。

7、显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位（A450nm< 0.5 ）时，表示试剂可能变质。

8、该试剂盒最佳反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。