菌种保藏的方法 斜面保藏法和穿刺保藏法 沙土管干燥保藏法:
真空冷冻干燥保藏法 液氮保藏法 悬液保藏法 低温保藏法 一种良好的菌种保藏方法,首先应保持原菌优良性状长期 稳定,同时还应该考虑方法的通用性、操作的简便性和设备 的普及性。具体的方法很多,现把多种方法按类排列后作一 综合性表解,以便读后有一全面了解。
产品名称 |
解藻弧菌(溶藻弧菌)保存方法 |
英文名称 |
Solution of algae (Vibrio alginolyticus Vibrio) |
货号 |
FSJ1105 |
使用说明书:
●复苏菌种前需先准备好适用于该菌生长的固体、液体培养基和培养设备,以形成无菌的操作环境。
●解藻弧菌(溶藻弧菌)保存方法开启之前,先用75%酒精棉消毒试管表面,按铝盖上的箭头方向打开瓶盖和胶塞,加入0.3ml左右的配套液体培养基,用无菌滴管反复吹吸,将冻干菌种溶解为悬液,然后用无菌滴管或接种环移至斜面、平板或液体培养基,并连同剩余菌悬液的试管一起放置于36℃培养箱中进行培养。
●次日观察菌种的生长情况,如未生长,应继续培养24h,或吸取培养之后的试管剩余菌悬液再次接种培养,培养24小时观察。
●菌株为一次性使用品,暂不开启的菌种应在4℃环境下保存。
●复苏后的菌种在传1-2代以后使用,建议菌种使用5代后弃用。
★综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
(1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
(2)按比例配制培养材料;
(3)导入曝气,进行繁殖培养;
(4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
(5)分离并检测;
(6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。
实验内容:
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
刺桐Erythrina arborescens Phaseollin 菜豆蛋白 13401-40-6 C20H18O4 ≥98%
盐醋皇柏减HucngBcijicnxy7nochloridq10mg/支
大鱼藤树Derris robusta Warangalone 攀登鱼藤异黄同 4449-55-2 C25H24O5 ≥95%
中药对照药材鹧鸪菜121335-200401TLC法鉴别
Curdione莪术二酮度:≥98%
木糖醇 Xylitol (≥98%,HPLC) 87-99-0 20MG 标准品
银杏叶 Ginkgo biloba Leaf P.E. 银杏内酯J 107438-79-9 C20H24O10 ≥98% 肌醇(Y0000485
对照品葡萄糖酸锌10332-0001检查
Flurbiprofen 扶比洛芬标准品5104-49-4 200mg扶比洛芬标准品
sativa piran 2',3'-二氢-7'-羟基-5'-甲氧基螺[环己烷-1,1'-[1H]茚]-4-酮 61262-81-5 C15H18O3 ≥98%
西贝母碱 Tanshinone IIA 61825-98-7 20mg
牡荆速葡萄糖苷Vitexinglucoside76132-8-220mg
6β-xy7noxyipolaMiide 6BETA-野芝新甙 87797-84-0
路路通酸
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