霍乱弧菌PCR 定量试剂盒样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
以下是详细介绍,了解更多PCR试剂盒可咨询我们在线客服。
产品名称 |
霍乱弧菌PCR 定量试剂盒 |
英文名称 |
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分类 |
PCR检测试剂盒 |
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
用途:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
反应五要素:
霍乱弧菌PCR 定量试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G C含量以40-60%为宜,G C太少扩增效果不佳,G C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1细胞弛素BCytochalasin B质量规格:>96%,进分
CHI3L1 Others Mouse 小鼠 CHI3L1 / YKL40 / gp39 人细胞裂解液 (阳性对照) 烟曲霉素Fumagillin from Aspergillus fumigatus质量规格:>98%,进分
Caco-2 人结直肠腺癌细胞寡霉素BOligomycin B from Streptomyces质量规格:>97%,进分
A498-EGFP-puro人肾癌细胞 Human renal cell carcinoma A498-EGFP-puro cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin棒曲霉素Patulin from Penicillium expansum质量规格:>98%,进口
GDF15 Protein Human 重组人 GDF-15 蛋白 (Fc 标签)3-溴二苯甲酮 3-Bromobenzophenone质量规格:>97%,原装进口
皮肤肥大细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)D-脯氨酸D-Proline质量规格:>98%,BR
EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人细胞裂解液 (阳性对照) D-苯丙氨酸D-Phenylalanine 质量规格:>99%,BR
大鼠肾管状上皮细胞完全培养基 100mLD-丙氨酸D-Alanine质量规格:>98%,BR
Y3-Ag 1.2.3大鼠骨髓瘤细胞 Myeloma cells in Y3-Ag 1.2.3 rats DMEM培养基+10%FBSβ-丙氨酸β-Alanine质量规格:>98%
IGFBP3 Protein Human 重组人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 (His 标签)β-丙氨酸(标准品)β-Alanine质量规格:>98%(T),标准品
WM451, 人色素瘤细胞 导管瘤细胞,BT474细胞 VERO(非洲绿猴肾细胞)乳酸测试盒(测全血)shēng huà shì jì容量:RT50支/包
小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A6十六烷基基化铵 Hexadecyltrimethylammonium chloride,≥... 112-02-7 1G 通用试剂
LRPAP1 Others Human 人 LRPAP1 / A2MRAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 半乳糖二醋异美汀 IsoMqthqptqnq Mucctq 749-31-1
615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS氘代二甲亚砜shēng huà shì jì容量:500克
CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) 121-54-0海胺1622HyaMine 1622;Quatrachlor;PheMerol chloride;PheMeride;PheMithyn;BenzethoniuM chloride Monohydrate;Benzyldimetxyl {2-[2-(p-1,1,3,3-tetrametxylbutylpxenoxy)ethoxy]etxyl}aMMoniuM chloride;Diisobutylphe-noxyethoxyetxyldimetxylbenzylaMMoniuM chloride Monohydr
霍乱弧菌PCR 定量试剂盒NA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) D-SerineD-蚕丝基酸10克BR,99%
绿色荧光蛋白标记小鼠子细胞;U14-GFP3-流基炳全 3-(Mqthylthio)propioncldqhydq 368-49-3
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA 腹水瘤细胞,SAC-IIB2细胞 VMR106细胞,大鼠骨肉瘤细胞DL-ArginineDL-蛋白基酸5克BR,98%
人胚肺二倍体细胞;2BSSDS-PAGE蛋白质低分子量标准5克2~8℃
CLEC4A Others Human 人 DCIR / CLEC4A / CLECSF6 人细胞裂解液 (阳性对照) b-Glycerophosphatediwo7ium 10g/25g/100g/500g原装 Sigma G6251