以下是肺炎支原体PCR定量试剂盒的详细介绍,了解更多PCR试剂盒可咨询我们在线客服。
产品名称 |
肺炎支原体PCR定量试剂盒 |
英文名称 |
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分类 |
PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
用途:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
反应五要素:
肺炎支原体PCR定量试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G C含量以40-60%为宜,G C太少扩增效果不佳,G C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12神经肽Y(2-36),人,大鼠Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)质量规格:>95%,BR
GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人细胞裂解液 (阳性对照) 神经肽Y(22-36)Neuropeptide Y (22-36)质量规格:>95%,BR
人结肠平滑肌细胞完全培养基 100mL神经肽Y(3-36),猪Neuropeptide Y (3-36)(porcine)质量规格:>95%,BR
M1细胞,小鼠白血病细胞 脆弱拟杆菌 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF骨钙素(7-19),人Osteocalcin (7-19) (human)质量规格:>95%,BR
CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)成骨生长肽Osteogenic Growth Peptide质量规格:>95%,BR
青霉素/链霉素溶液P/SL-脯氨酰胺L-Prolinamide质量规格:0.98
VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人细胞裂解液 (阳性对照) L-谷氨酸(标准品)L-Glutamic acid质量规格:>99%(TLC),标准品
人急性T细胞白血病细胞;Jurkat, Clone E6-1L-谷氨酸(sigma)L-Glutamic acid质量规格:>99%,Sigma分装
H7402细胞,人肝癌细胞 小鼠艾氏腹水癌细胞,EAC细胞 非洲绿猴肾细胞;VERO-76DL-谷氨酸DL-Glutamic acid monohydrate质量规格:>98%,水合物
MGC80-3(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2肌氨酸Sarcosine 质量规格:>99%,BR
非洲绿猴肾细胞;VERO C1008 (E6) 中国仓鼠肺细胞,V79细胞 HCCC-9810(胆管细胞型肝癌细胞)分子筛, 5 Å(干燥剂用)质量规格:干燥剂用Molecular sieves, 5 Å
EB病毒转化的人B细胞;KMY1008分子筛, 5 Å(pellets,3-5 mm)质量规格:pellets,3-5 mmMolecular sieves, 5 Å
CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) 格列齐特质量规格:>95%,BRGliclazide
CM-R029大鼠肠平滑肌细胞完全培养基100mL格列齐特(标准品)质量规格:HPLC>95%,标准品Gliclazide
CDH18 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 人细胞裂解液 (阳性对照) 格列本脲质量规格:>99%,BRGlyburide/Gliebenclamide
肺炎支原体PCR定量试剂盒ARPE-19(人视网膜上皮细胞) 5×106cells/瓶×2泛影酸钠(>98%,BC)质量规格:>98%,BCSodium diatrizoate dihydrate
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟铝酸钠(>98%,BR)质量规格:>98%,BRSodium fluoroaluminate
兔肾细胞;RK-13马尿酸钠(>98%,BR)质量规格:>98%,BRSodium hippurate
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 钠(>95%,BR)质量规格:>95%,BRSodium laurate
Ishikawa 人子宫内膜癌细胞吡嗪(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Pyrazine
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。