蛋白酶K

英文名：Pro teinase K

别名：Endopeptidase K; Prok; Protease K; Tritirachium album proteinase K

产品名称：蛋白酶K

CAS 登录号：39450-01-6

EINECS 登录号：254-457-8

活性：>30U/mg

白色或类白色粉末，是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶，来源于白色念球菌(. Tritirachium album. )，具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活，反而增强和稳定酶活性，并在较广的PH范围内（PH4-12.5）均有活性。在组织或细胞核酸分离时，使核酸酶（RNA和DNA）以及反应中其他酶失活

蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，从布氏白僵菌（Beauveria bassiana）中纯化得到，用于生物样品中蛋白质的一般降解。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。在较广的pH范围内（pH 4-12.5）均有活性，在尿素和SDS中也较为稳定，还具有降解天然蛋白质的能力。

规格：100毫克普通装或客户定制

比活性值：38 U蛋白

来源种属：酵母菌

分子质量：28,650

（二）、产品检测报告

1、稀释缓冲液

根据需要，利用20mM Tris-HCL 缓冲液（PH 7.5）溶解成20mg/ml的工作浓度。

2、质量说明

活性单位定义

37℃、PH7.5条件下，每分钟可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量，定义为一个单位。

脱氧核糖核酸酶残留

以λDNA为底物，37℃消化4小时以上，未检测到脱氧核糖核酸酶活性。

核糖核酸酶残留

37℃消化12小时以上，未检测到核糖核酸酶活性。

3、酶纯度测定（SDS-PAGE）

结果：蛋白酶K纯度超过99.2%。

4、酶活性测定

蛋白酶K比活性值

比活性值（U）38

5、酶稳定性测定（-20℃冷冻条件下，12个月的数据）

结果：干粉状态正确储存，一年内酶活性保持不变；溶解状态酶活性一年内降低小于2%。

1、’动物基因组提取（蛋白酶K浓度为20mg/ml）

不影响动物基因组的有效提取√

与不加蛋白酶K的样品相比，能有效降解蛋白质√

2、降解蛋白质能力

与15ug BSA 37℃孵育1小时，BSA可有效降解√

（三）、抑制剂

  蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶，因此可以用苯甲基磺酰氟抑制其作用，苯甲基磺酰氟是一种丝氨酸蛋白酶的抑制剂。在纯化蛋白质时用于防止蛋白质的降解。

（四）、应用范围

  蛋白酶K的用途广泛，主要的应用行业包括：医疗及基础研究领域：基因诊断试剂盒；基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶；此外，还应用于：皮革工业（皮革软化及精细化、脱毛和软化、蚕丝脱胶）制备脉冲电泳的染色体DNA；提取组织中非蛋白成分时，降解含有蛋白质杂质；食品、酿造工业：肉类嫩化、酒类澄清；洗涤工业：酶洗衣粉、洗衣液等也有应用。

（五）、贮存和使用

  干粉条件下有效期为24个月，液态时-20℃保存12个月。客户利用缓冲液溶解后，需要-20℃贮存。溶解后，最好分装成若干份，方便使用，避免反复冻溶。如果需要在2-8℃环境下放置，超过三天，建议过滤除菌或加入抑菌剂如3%叠氮化钠，防止微生物污染。

  孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时；理想孵育时间为2小时。

三、产品优势

  蛋白酶K，是一种来源于新发现的真菌蛋白酶K基因，经优化后异源重组表达得到的切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于该蛋白酶K在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白质的能力，因而被广泛应用于制备脉冲电泳的染色体DNA、蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。

  严格的对比实验研究表明，本公司产品蛋白酶K与现有市场上林伯氏白色念球菌来源的蛋白酶K产品相比，对大片段蛋白质的切割能力基本相同，而在小片段蛋白质的降解能力方面较其他产品活力高出50%以上。

  通过工艺优化及单因素实验分析，优化调整培养基配方；采用先进的节能设备，降低能耗、降低生产成本。

  

四、产品市场前景分析

  由于蛋白酶K优良的蛋白水解能力和特性，除了在生物科学研究方面，其在食品加工、饲料生产、环境保护、医药工业、能源和资源开发等各个领域都有快速增加的需求。蛋白酶K 的广泛应用范围让我们看到了未来市场对蛋白酶K 的迫切需求，因此，在生物医药等市场迫切需求和发展趋势的前提下，结合自身资源配置能力，巅峰未来的发展，一是继续研究蛋白酶K的分子结构与功能的相互关系，采用多种高通量技术进化分子结构，进一步提高酶催化特性；另一方面，提高蛋白酶K的重组表达技术，大幅度提高生产水平和降低生产成本，满足该重要酶在食品和饲料加工过程中的不断增加的迫切需求。

  中国市场表现与西方市场有较大差异，除淀粉糖化酶、碱性蛋白酶外，其他酶种目前消费很少，但随着酶工程技术的研究开发，燃料乙醇、生物柴油等生物能源、生物环保、生物制造等领域，酶制剂有着广泛的应用。国民经济中占据重要地位但原料和能源消耗大、环境污染严重的造纸、纺织、制药、饲料等行业，酶制剂的应用也在扩大，未来市场前景一片大好。

  酶制剂产品定位--让巅峰酶制剂成为生物技术和生物制药行业的高端产品，未来在成功开发蛋白酶K的基础上，充分发挥校企联合的优势，开发系列酶产品。在未来3-5年，占据市场份额50%以上。