速溶款小分子肽的生产工艺:
利用凝胶网状结构,根据分子大小和形状差异进行分离的一种方法。当样品进入凝胶柱后,较大分子不能通过孔道进入凝胶柱体内,而与流动相一起流出层析柱,而小分子则渗入凝胶内。它具有分离条件温和,产品收率高,生物活性好,分离面宽等优点,广泛用于多肽物质的分离纯化中。采用凝胶过滤色谱法分离分子量<1 200 Da的小肽。 进行分离收集分子量<1 200 Da的肽段,根据最后蛋白含量数据, 分离得到的小肽居多,分离效果较好。通过柱层析分离出的分子量<1 200 Da的肽可以进一步采用高效液相制备色谱分离以获得更高纯度的肽产品。
一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基可以缩合成肽,形成的酰胺基在蛋白质化学中称为肽键。氨基酸的分子最小,蛋白质最大,两个或以上的氨基酸脱水缩合形成若干个肽键从而组成一个肽,多个肽进行多级折叠就组成一个蛋白质分子。蛋白质有时也被称为“多肽个氨基酸相连为二肽,依此类推还有三肽、四肽……10个以下氨基酸组成的称寡肽(小分子肽),超过十个就是多肽,而超过五十个就被称为蛋白质。大分子蛋白质多是组成氨基酸超过100的长肽链。肽键就是氨基酸的α-羧基与相邻的另一氨基酸的α-氨基脱水缩合的共价键,故肽链两端有自由的α-氨基或α-羧基,分别称为氨基末端或羧基末端。随着组成氨基酸单元的不同,其性质和功能有很大差异小分子肽亲水基团,又称疏油基团,具有溶于水,或容易与水亲和的原子团。可能吸引水分子或易溶解于水,
肽在不同pH、温度、离子强度、氮浓度条件下都是可溶的。其比未经水解的分离蛋白溶解度有极大的提高,超过90 %,这主要是因为酶解引起蛋白质相对分子质量的减少,端基极性基团增加使溶解度增加。尤其在pH 4. 2等电点处水解液中溶解度的测定表明多肽不仅提高了一般pH下蛋白质的溶解度,更重要的是大大改善了在等电点时蛋白溶解度。
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